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    缺失肽的成因及避免策略

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    缺失肽的成因及避免策略

    发布日期:2019-04-29 作者:江苏蜜桃污APP视频下载安装肽业科技有限公司 点击:

    蜜桃视频网页版固相合成中,亚洲AV蜜桃综合缺失是最常见最严重的问题之一。缺失肽与目标蜜桃视频网页版的不同在于少了一个或几个亚洲AV蜜桃综合,一般情况下,这些缺失肽的极性与目标蜜桃视频网页版的极性是非常接近的,从而增加了纯化的难度。

    上图展示了使用SPPS合成的>40mer的蜜桃视频网页版,即使经过细致的二维HPLC纯化后,把绝大多数的杂质给分走了,但仍然有缺失肽未能完全分开。这说明了缺失肽严重的影响固相蜜桃视频网页版的合成纯度。下面给大家介绍缺失肽的成因以及如何避免其形成。

    1.亚洲AV蜜桃综合偶连不完全

    在固相合成中,亚洲AV蜜桃综合偶连不完全是缺失肽形成的重要原因之一。在亚洲AV蜜桃综合偶连后,进行封端能够避免极性相近的缺失肽的形成。一般情况下,封端肽要比缺失肽更容易分离与辨认。

    避免缺失肽形成的策略:每步偶连亚洲AV蜜桃综合后进行封端处理或者至少在难偶连的亚洲AV蜜桃综合后进行封端。

    2.Fmoc保护基脱除不完全

    脱除Fmoc保护基不完全导致的亚洲AV蜜桃综合缺失:

    Fmoc难脱除的反应进行监控:

    避免缺失肽形成的策略:辨明难脱除的Fmoc保护基位点并优化其脱保护条件。

    3.二酮哌嗪的形成

    二酮哌嗪的形成导致双亚洲AV蜜桃综合的缺失:

    避免缺失肽形成的策略:

    (1)避免容易形成二酮哌嗪的N端的序列;

    (2)N端容易发生环化形成二酮哌嗪时,避免使用强酸或强碱等;

    (3)使用大位阻的树脂。

    4.未对反应不完全的树脂进行封端

    未对树脂上未反应的反应位点进行封端会导致C端缺失肽的形成。

    避免缺失肽形成的策略:确保树脂完全反应。

    5.原料含有杂质

       比如说,在自己准备的二肽原料中含有杂质,这样也会导致缺失肽的产生:

    避免缺失肽形成的策略:严格控制用于固相合成的原料纯度。

    6.反应体系中出现醛或酮

    Kent发现含有醛基的树脂会引起缺失肽的产生。醛基或酮羰基会通过如下图反应的机理来使N端无法正常偶连,从而产生缺失肽。

    除了树脂上的醛或酮羰基以外,溶剂或原料中的醛或酮也会对裸露的N端进行暂时性的封端,从而导致缺失肽的产生。

    避免缺失肽形成的策略:确保用于固相合成的树脂、溶剂、试剂和反应物中没有醛或酮类杂质。

    总结:

    1.产生缺失肽的原因有很多;

    2.在固相合成中,抑制缺失肽的形成是非常重要的,这样能降低分离纯化的难度;

    3.避免缺失肽产生的策略有很多,具体采取何种策略必须根据实际情况而定;

    4.必须严格控制固相合成中的原料纯度、反应条件等因素,这样才能减少缺失肽的产生。

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